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最新公告:   关于采购信息科声像室“音视频系统”的公告  2016-10-10
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获奖成果

 1 中国人遗传性b5R缺陷的分子遗传学、免疫学及酶学研究
    本项目从分子生物学、免疫学和酶学三方面对NADH-细胞色素b5还原酶 (简称b5R)缺陷引起的遗传性高铁血红蛋白血症(简称HM)进行了系统研究。利用分子生物学技术,在中国HM患者中发现了4种突变的b5R基因 型:R57Q/R57Q、L72P/L72P、C203Y/C203Y和R57Q/C203Y,其中后3种为国际首报b5R基因突变类型。通过对原核表达 C203Y突变体的分析,结合免疫学研究,阐明了I型HM发病的分子机制。在免疫学方面,制备了b5R抗血清和国际上仅有的两株b5R单克隆抗体,建立了 测定b5R含量的酶免疫方法,对正常人、新生儿和I型HM患者红细胞b5R含量进行了测定,证明b5R含量低是新生儿和I型HM患者红细胞 b5R活性低的直接原因。在酶学方面,改进了测定b5R活性的Hegesh法,创立了b5R活性测定的斑点法,对中国正常成人、新生儿和HM患者进行了大 量酶学调查。本项目已发表研究论文27篇,其中在国际杂志发表5篇。所发现的3个突变的b5R基因序列已在国际基因数据库GenBank正式登 录,L72P突变尚被国际最大的网上单基因遗传数据库OMIM收录。该项目获国家科技进步二等奖。
    2 中国人遗传性b5R缺陷的分子遗传学、免疫学及酶学研究
    本 项目在对中国人遗传性高铁血红蛋白血症(HM)的系统研究中,发现了三种NADH-细胞色素b5还原酶(b5R)基因点突变,即 57位密码子的CGG→CAG突变、第72位密码子的CTC→CCC突变和第203位密码子的TGC→TAC突变,其中后2种为世界首报;建立了与3种突 变相应的PCR-RFLP基因诊断方法;开创了以b5R单抗应用为基础的b5R和HM免疫学研究,证明b5R含量低是新生儿和部分HM患者红细胞 b5R低的直接原因; 改进了测定b5R活性的经典方法,对中国正常成人、新生儿和HM患者进行了大量酶学调查。本项目已发表论文23篇,其中在国际杂志发表4篇;所发现的3个 突变b5R基因序列已被国际上主要基因数据库正式收录;对Hegesh法的改进已编入医学检验学专著;一些国外同行来信索取b5R单抗;为8个HM家系提 供了遗传咨询和免费诊疗。本项目适用于高铁血红蛋白血症的实验诊断、人群发病监测、产前基因诊断和基因治疗等方面。该项目获军队科技进步一等奖。
    3 新型DNA抗体检测方法的研究及其临床应用
    本 研究以纯化大肠杆菌质粒双链DNA(ds-DNA)作为抗原,生物素化后结合于事先吸附了亲和素的硝酸纤维素(NC)膜上,嵌入特制的渗滤反应盒内,血 清抗ds-DNA抗体(IgG)经过渗滤反应与膜上ds-DNA结合,再与胶体金标记的葡萄球菌蛋白A反应,可在滤膜上显示肉眼可见的红色斑点。该方 法具有不需任何仪器设备,任何单位和个人均可操作;整个检测过程只需2分钟,是目前最快的一种方法;敏感性、特异性和稳定性优于国内外现有的任何一种方 法。本项目大力推广后可淘汰原有繁琐费时的方法,所生产的“抗双链DNA抗体快速检测试剂盒”,已通过国内数家生物工程公司在全国各地广泛应用,普遍认为 该试剂盒简便、快速、准确、实用。该项目获军队科技进步二等奖。
    4 解析单克隆抗体可变区基因序列的实验方法及其应用
    本 项目创立了“单引物预掺入PCR”方法,对新兴的PCR产物直接测序技术做了多项改进和探索,从而建立了一套解析单克隆抗体可变区基因序列的实验方法。利 用此方法,对一组单克隆天然自身抗体进行了分子遗传学研究。利用单引物预掺入PCR,在不改变通用引物的情况下,使一组单克隆天然自身抗体的10个可变区 cDNA均获得放大,而常规PCR法只能使其中的4个获得放大。接着利用PCR产物直接测序法,确定了10个可变区的序列。该组单克隆抗体基因序列的的解 析,有助于阐明其分子特征。单引物预掺入PCR还为引物设计和非抗体基因的体外扩增提供了思路。本项目已在国际杂志发表论文2篇,在国内核心期刊发表论文 4篇,取得了显著的社会效益。部分论文被国际著名检索工具收录。有来自11个国家的25名学者来函索取论文。该项目获军队科技进步二等奖。
    5 《实用医学检验学》
    本 书由军内20名医学检验专家、教授历时四年撰写完成,是大型权威性医学检验学参考书。全书6篇69章,1821字,内容涵盖临床血液学、生物化学、微生物 学、免疫学、脱落细胞学、细胞遗传学和分子生物学等。详细介绍了各种检验项目的操作方法、试验原理、注意事项、参考值、方法学评价等。理论联系实际,注重 先进性、准确性和严谨性,具有较高的学术水平和实用价值。本书对推动我国医学检验专业的科技进步和培养人才发挥了重要作用,具有重大的社会、经济效益。本 书已作为国家卫生部医政司《全国临床检验操作规程》主要参考书,并为广大论文作者引用。1993年,该书获第七届“中国图书奖”。 该项目获军队科技进步二等奖。
    6 多种自身抗体检测新方法的建立及临床应用
    本项目为自选及福建省青年科技人才创新项 目(No.2002J060)。应用领域:平战时军民自身免疫病的快速联合检测,适合部队基层中小医院及野战野外条件下使用。技术原理:涉及分子生物学与 免疫学技术。本项目研究历时15年,共发表论文近30篇,其中在中华级杂志上发表论著7篇,有10篇论文被引用,共计达43篇次,大部分为他引。本研究的 创新点:1. 国内最早报道(1994年)以纯化的细菌质粒DNA作为抗ds-DNA抗体的检测配体,避免了单链DNA的污染,提高了特异性;2. 国内最早报道以链霉亲和素-生物素系统作为将双链DNA连接到固相载体的连接手段,是链霉亲和素-生物素系统的新用途;3. 国内外最早报道采用斑点免疫金渗滤法(DIGFA)检测抗ds-DNA抗体,具有简便、快速、准确的优点;4. 采用基因克隆技术在大肠杆菌原核及毕赤酵母真核系统中同时表达多种人自身抗原,并将其作为检测相应自身抗体的配体;5. 率先推出以具备真核蛋白特征的多种毕赤酵母重组自身抗原为配体的全新自身抗体胶体金快速联合检测试剂盒,具有领先水平和实用性,目前国内外尚未见同类试剂 盒。研究成果之一:抗ds-DNA抗体DIGFA检测试剂盒在军内外临床应用十余年,创造了一千多万元的经济效益,社会反响很大。本项目研究的后期工作着 重于自身抗体的快速联合检测,已取得初步成功,有望在不远的将来在军内外全面推广应用。该项目同时获军队医疗成果、福建省科技进步及福建医学科技奖二等 奖。
    7 对导致生育缺陷的染色体断裂、缺失、重组分析和定位研究
    生育缺陷是困扰育龄夫妇的一大难题,当前约有10% 夫妇患有不育症,一些患者不明原因无精子或精子数量极少。染色体断裂、缺失、重组是导致婴幼儿畸型、智力低下及习惯性流产、不孕不育、无精子症等的重要原 因。Y染色体是男性特有的重要性染色体 ,近几年国外研究表明,Y染色体上多个基因在控制男性性腺发育、精子生成中起十分重要作用。寻找、发现与生育缺陷有关的染色体断裂点,即时发现遗传病携带 者,在生育前做好遗传检查,预防遗传缺陷患儿的出生是我们医务工作者的责任。采用染色体核型分析、荧光原位杂交、多重PCR、多个序列标签位点和单个核苷 酸多态性分析等多项细胞遗传学和分子遗传学相结合的先进技术,对发现的染色体断裂、缺失和重组的特殊病例进行分析定位研究,寻找染色体的断裂特点和遗传规 律,研究断裂形成的机制与遗传性生育缺陷的相关性。创新点:1.2002年至2009年,经中国医学遗传学国家重点实验室鉴定,发现国内外未见报道的染色 体异常核型61种,发现新核型的数量在国内领先。2.建立并用于临床的Y染色体AZF微缺失分子诊断方法,发现2例sY129缺失,国内未见报道。3.采 用扩增多个STS和SNP分析方法,对Y染色体AZF大片段缺失部份标本的断裂点进行大致定位,其中1例AZFb区单独缺失,国内未见报道。4.对160 例精子生成障碍患者和76例正常生育男性,进行AZFc区部份缺失定位分析研究。新发现b1/b2缺失和b1/b3缺失是导致精子生成障碍的高风险因子。 该研究技术水平先进,在临床一定数量的病例中得到验证,解决了临床中急需解决的遗传诊断问题,为优生优育提供了新的诊断手段,具有一定的社会和经济效益。 该项目获军队医疗成果二等奖。
    8 信号识别颗粒的成分及其相互作用的研究
    SRP54蛋白是信号识别颗粒的一个关键组 分。对人SRP54蛋白328~330位的TLR3个氨基酸进行人工诱变,在大肠杆菌中表达了A3突变体,并对A3突变体进行纯化和凝胶过滤分析。观察到 A3突变体丧失了与SRPRNA结合的能力,其自身也不能形成二聚体。结果证明,TLR这3个氨基酸残基与二聚体结构的形成有关,TLR是SRP54蛋白 结合SRPRNA和新生蛋白质信号肽所必需的关键性氨基酸序列。该项目获福建省科技进步二等奖。
    9 膜联蛋白家族新成员Anx B1的基因表达、结构、功能及药用活性研究
    从 猪囊尾蚴cDNA文库中首次克隆出一个具有自主知识产权的膜联蛋白家族新成员annexin B1,简称Anx B1。该蛋白具有多种生物活性,如钙磷脂依赖性、抗凝血活性、诱导细胞凋亡等。Anx B1基因在原核、酵母真核系统获得高效表达,具有猪囊尾蚴蛋白疫苗活性,可研制抗凝血和溶栓药物;其核酸疫苗已进入农业部田间试验,取得良好效果。该项目 获福建省科技进步二等奖。
    10 醋酸纤维素免疫吸附膜和亲和层析柱纯化抗原抗体研究
    本研究介绍用加工成颗粒性的硝酸 纤维素作为固相配体支持物,制备一种新的免疫吸附亲和层析柱,用于纯化抗原抗体。该法制备简单,固相支持物连接抗体之前不需活化处理和使用化学交联剂。实 验结果表明,纯化的抗原抗体纯度较高,收获量也大,是一种实用的柱层析技术。该项目获军队科技进步二等奖。
    11 阴道毛滴虫免疫学诊断技术的研究
    滴 虫性阴道炎是最常见的性传播疾病之一,目前实验室常规诊断方法为湿片镜检,对该病的检出率仅为50%~70%,近年来国内外有少数作者建立了滴虫性阴道炎 的免疫学方法。本研究采用两株抗不同表位的单克隆抗体,共价交联到羧化乳胶的凝集试验,国内外尚未见报道。用本法检测标本,快速、简便、灵敏度高,试剂稳 定性好。该项目获军队科技进步二等奖。
    12 抗HCG-ß亚单位单抗的研制
    应用杂交瘤技术,获得5株能持续分泌抗 hCG单克隆抗体(MAb)的细胞株。5株杂交瘤细胞中有两株分泌的MAb能单一地与胶乳滴配作为妊娠诊断试剂。 用此MAb作胶乳凝集抑制试验,与市售“妊娠试剂”对照,结果优于对照试剂。特别是用杂交瘤细胞培养上清液即可直接用作妊娠诊断试剂,且敏感性和特异性均 很好,这在国内尚未见报道。该项目获军队科技进步二等奖。
    13 人肝细胞癌的基因靶向RNA干扰治疗实验研究
    探索基 于人甲胎蛋白基因启动子构建的siRNA表达载体介导目的基因RNA干扰的可行性,为实现肝癌细胞靶向RNAi治疗作一初步研究。结果发现人甲胎蛋白基因 启动子驱动的siRNA表达载体可在表达AFP的细胞HepG2中有效介导靶基因的RNAi效应,为临床肝癌细胞靶向的基因特异性RNAi治疗提供了初步 的实验依据。该项目获福建省医学科技奖二等奖。
    14 新型囊虫病快速斑点免疫金渗滤法检测试剂盒的研制及临床应用
    由 猪囊尾蚴引起的囊尾蚴病(俗称囊虫病)是世界性人兽共患寄生虫病,对部队官兵的健康及养猪业危害很大。目前,在囊虫病检测方面,国内外主要采用从猪囊尾蚴 虫体中提取天然粗抗原制备试剂盒,但由于虫体抗原成分复杂,交叉反应严重,效果不理想;也有运用基因工程技术,在大肠杆菌原核系统表达猪囊尾蚴抗原基因, 但包涵体的变复性处理非常繁琐,纯化困难,产量低,尤其对真核蛋白不能进行糖基化、磷酸化、二硫键折叠等翻译后修饰加工,影响其免疫原性等重要生物活性。 本研究采用的猪囊尾蚴抗原cC1具有自主知识产权,是在猪囊尾蚴cDNA文库中筛选并命名的一个具有免疫保护作用的人猪共同抗原。本研究的创新点:1.首 次成功将猪囊尾蚴抗原cC1在巴斯德毕赤酵母分泌型真核表达系统中高效表达,同时对表达条件进行了优化,又进一步对酵母与原核表达产物的特征做了比较分 析。2.发现cC1蛋白在毕赤酵母中被磷酸化修饰,分子量增大,等电点降低,免疫原性明显高于原核产物,蛋白表达量高、易纯化且成本低。3. 首次以酵母表达的cC1抗原作为配体,建立了囊虫病膜斑点免疫金渗滤法(DIGFA), 具有简便、快速、准确的优点,不需任何仪器设备,检测时间只需2至5分钟。该项目获军队医疗成果三等奖。
    15 人凝血因子ⅨcDNA在家兔体内的高效表达和检测
    凝 血因子Ⅸ(简称Ⅸ因子)是人体凝血系统的重要成份之一。它的缺乏或功能缺陷可导致血友病B的发生.近年来,随着高效安全的基因转移技术迅速发展,逐渐从实 验室走向临床试验阶段,并已获得了令人可喜的成果.在血友病B的基因治疗研究中,我们构建了人凝血因子ⅨcDNA的双拷贝病毒载体(double- copy retroviral vector)-N2 CMVⅨ和人凝血因子ⅨcDNA的重组质粒载体CMVⅨ,载体转入兔子原代培养的成纤维细胞(RSF)后,将高效表达人Ⅸ因子的转化细胞用胶原包埋并移植 到兔子体内,用ELISA和Western blot均检测到了人Ⅸ因子蛋白的表达,证实了在家兔体内长期表达的Ⅸ因子蛋白确实是外源转入的人ⅨcDNA所表达的蛋白,这为临床试验提供了可靠的动物 试验依据。该项目获军队科技进步三等奖。
    16 一种新的梅毒免疫学快速诊断法的建立及临床应用
    本项目将提纯的牛心肌 类脂质作为抗原包被于硝酸纤维素膜上,嵌入特制的渗滤反应盒内,血清或血浆中的反应素经过渗滤反应与膜上的类脂质抗原快速结合,再与胶体金标记的葡萄球菌 蛋白A反应, 显示肉眼可见的红色斑点。此项成果主要用于梅毒快速诊断和疗效判断。该法不需任何仪器设备,适合各级医院使用,是目前最简便的一种检测反应素的方法;整个 检测过程只需2分钟,是目前最快速的一种检测反应素的方法;特异性和灵敏性与目前常用的快速血浆反应素试验(RPR)法相同;试剂有效期长。 本法检测血清(或血浆)反应素为国际首创,研究论文于发表在国际期刊Journal of Clinical Microbiology上。已在国内部分地方推广应用, 反应良好,并取得一定的经济效益。该项目获军队科技进步三等奖。
    17 血清肌红蛋白三种检测方法的建立
    血 清肌红蛋白(MYO)是急性心肌梗塞最灵敏的早期标志物。本项目建立了三种检测MYO的方法:ELISA定量法(I)、30分钟一步快速ELISA定性或 定量法(II)、金标快速斑点免疫结合试验法(III)。 I法的原理是双抗体夹心固相酶联免疫吸附试验(ELISA)。II法是在I法的基础上加以改进,其原理是一步法ELISA(MYO抗原与包被在固相上的抗 体及酶标抗体同时反应),并在反应中加入聚乙二醇做催化剂使得整个检测只需30分钟。III法的原理是将羊抗人MYO包被硝酸纤维素膜,嵌入特制的渗滤反 应盒内,血清中的MYO经过渗滤反应与膜上的抗体快速结合再与胶体金标记的单克隆抗MYO抗体反应,显示肉眼可见的红色斑点。研究论文刊登在国际性期刊 Clinica Chimica Acta。该项目获军队科技进步三等奖。
    18 避孕药醋炔诺酮肟对果蝇的致畸性和致突变性的研究
    醋 炔诺酮肟是一种极有希望的新型避孕药,具有避孕效率高、副反应小、服用简便等优点。但是对其长期使用的安全性如何尚待作出评价。本课题用果蝇检测系统的三 种试验方法(果蝇伴性隐性致死试验、果蝇非整倍性试验、果蝇致畸试验),让亲代雄蝇摄入醋炔诺酮肟后,同处女蝇分阶段产卵,观察其子代的致畸率、致死率、 染色体丢失及不分离率,与正常对照比较进行统计学分析得到正确的实验结果,从而对醋炔诺酮肟的致畸性和致突变性作出评价。该项目获军队科技进步三等奖。

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